💧 环境实验 · 仪器分析
HPLC
高效液相色谱
C18反相色谱 · 等度/梯度洗脱 · 多检测器
4种
检测器
等度
梯度双模式
实时
色谱图
自动
积分定量
原理
高效液相色谱法
HPLC 用高压泵将流动相（液体）泵入色谱柱，利用样品中各组分在固定相和流动相中分配系数的差异实现分离。GC的色谱图代码直接复用。
💧
流动相
甲醇/乙腈/水/缓冲盐按比例混合，作为载液。等度 vs 梯度洗脱方式影响分离度和分析时间。
C18反相常用
📐
色谱柱
C18（非极性）是最常用的固定相。氨基柱/手性柱用于特殊分离，柱温影响保留时间。
C18通用柱
🔍
检测器
UV/DAD紫外检测器最常用（可调波长），FLD荧光检测器灵敏度最高（ppt级），RID示差检测器用于无紫外吸收的化合物。
按需选型
📈
定量方法
峰面积与浓度成正比（与GC相同），外标法/内标法/面积归一法。
复用GC逻辑
💧 HPLC 交互模拟
⏳ 准备进样
色谱分离 · 峰积分 · 定量
保留时间
— min
峰面积
—
检测器
UV 254nm
结果
—
色谱图 · 实时绘制
检测器
UV 254nm
UV 220nm
DAD 全波长
FLD 荧光
RID 示差
色谱柱
C18 反相柱
氨基柱 亲水
手性柱
洗脱方式
等度 60% MeOH
梯度 30→90%
柱温 (℃)
35
流动相组成
60% MeOH / 40% H₂O
MeOH ███ H₂O ███
💧 进样分析
🔄 重置
操作：
选检测器/色谱柱 → 设洗脱条件 → 进样 → 观察色谱图
总结
HPLC 关键要点
💧
反相C18
最常用的色谱柱，非极性固定相，适合大多数有机物的分离
📈
等度vs梯度
等度简单快速，梯度分离效果好但需平衡时间
🔍
检测器选择
UV通用，FLD灵敏，RID通用性差但适合糖类
🌡️
柱温影响
温度升高→保留时间缩短→分离度降低
环境实验 · HPLC · 依据 GB 5009 系列 /《中国药典》
本页依据标准与现行状态
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标准号
标准名称
状态
本页用途
GB 5009
食品安全国家标准 理化检验方法系列（多部分，强制性）
待核
—
本页共依据
1
项标准：
0
项已回官方源核验（截至 2026-09-11），1 项待核。 核验来源与全部条目见《标准依据溯源总表》。本页数值与曲线用于教学演示，不作为工程设计或检测报告的依据。
二维码
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