💧 EnvLab · 仪器分析

HPLC 高效液相色谱

C18反相色谱 · 等度/梯度洗脱 · 多检测器

4种检测器

等度梯度双模式

实时色谱图

自动积分定量

原理

高效液相色谱法

HPLC 用高压泵将流动相（液体）泵入色谱柱，利用样品中各组分在固定相和流动相中分配系数的差异实现分离。GC的色谱图代码直接复用。

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流动相

甲醇/乙腈/水/缓冲盐按比例混合，作为载液。等度 vs 梯度洗脱方式影响分离度和分析时间。

C18反相常用

📐

色谱柱

C18（非极性）是最常用的固定相。氨基柱/手性柱用于特殊分离，柱温影响保留时间。

C18通用柱

🔍

检测器

UV/DAD紫外检测器最常用（可调波长），FLD荧光检测器灵敏度最高（ppt级），RID示差检测器用于无紫外吸收的化合物。

按需选型

📈

定量方法

峰面积与浓度成正比（与GC相同），外标法/内标法/面积归一法。

复用GC逻辑

💧 HPLC 交互模拟

⏳ 准备进样色谱分离 · 峰积分 · 定量

保留时间

— min

峰面积

—

检测器

UV 254nm

结果

—

色谱图 · 实时绘制

检测器

色谱柱

洗脱方式

柱温 (℃)

流动相组成60% MeOH / 40% H₂O

MeOH ███ H₂O ███

操作：选检测器/色谱柱 → 设洗脱条件 → 进样 → 观察色谱图

总结

HPLC 关键要点

💧

反相C18

最常用的色谱柱，非极性固定相，适合大多数有机物的分离

📈

等度vs梯度

等度简单快速，梯度分离效果好但需平衡时间

🔍

检测器选择

UV通用，FLD灵敏，RID通用性差但适合糖类

🌡️

柱温影响

温度升高→保留时间缩短→分离度降低

EnvLab · HPLC · 依据 GB 5009 系列 /《中国药典》

📜本页依据标准与现行状态1 项标准 · 已回官方源核验全部现行待核 1▶

标准号	标准名称	状态	本页用途
GB 5009	食品安全国家标准理化检验方法系列（多部分，强制性）	待核	—

本页共依据 1 项标准：0 项已回官方源核验（截至 2026-09-11），1 项待核。　核验来源与全部条目见《标准依据溯源总表》。本页数值与曲线用于教学演示，不作为工程设计或检测报告的依据。

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